一、飼料行業(yè)霉菌毒素污染概述
養(yǎng)殖行業(yè)的源頭在飼料,飼料質量的好壞直接影響乳品的優(yōu)劣,因此需從源頭上加以控制。飼料中最主要的污染物來自霉菌毒素,不僅會通過的新陳代新帶入生乳中,產生所謂的“毒奶”,更要的是霉菌毒素會危害奶牛的健康并嚴重影響產奶水平,造成隱形的重大經濟損失。
霉菌毒素(mycotoxins)是某些真菌在污染的糧食和谷物的生長繁殖過程中,產生的具有毒害作用的次級代謝產物,由其引起的中毒癥狀被稱作是霉菌毒素中毒癥狀(mycotoxicoses)。目前,已經發(fā)現霉菌毒素的種類達400多種,其化學、生物學和毒理學性質多種多樣,主要的毒性作用包括致癌作用、遺傳毒性、致畸作用、肝細胞毒性、中毒性腎損害、生殖紊亂和免疫抑制。霉菌毒素的存在不僅給人類及牲畜的健康帶來極大的危害,也造成了相應的經濟損失。據聯(lián)合國糧食與農業(yè)組織(Food and Agriculture Organization of the United Nations,FAO)統(tǒng)計,全球每年約有25%的農作物被霉菌毒素污染,約2%的農作物因污染嚴重而失去營養(yǎng)和經濟價值,造成數千億美元的經濟損失。
二、現有檢測方法比較
目前霉菌毒素的檢測方法主要分為兩大類:即確認方法和快速方法。確認方法主要基于理化儀器設備,如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯(lián)用技術如氣質聯(lián)用(GC-MS)、液質聯(lián)用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化學基礎上的免疫分析方法如免疫親合柱-熒光檢測(IAC-FLD)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析法等。
結果準確、法定認可是理化方法最大的優(yōu)點,但是儀器設備價格昂貴,前處理過程復雜、操作繁瑣、效率低,成本極高,因此不適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內控檢測,一般僅用于最終的確證。酶聯(lián)免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測卡是企業(yè)常用的快速檢測方法,但也均存在各自的優(yōu)缺點:ELISA 方法能靈敏度相對較高,且能定量檢測,但操作過程相對復雜,對環(huán)境和人員要求高,環(huán)境干擾因素復雜,重復性較差;膠體金檢測卡可以滿足現場快速的要求,能在5-10min內快速測定,但是只能定性,且靈敏度較低,肉眼觀察主觀性較強,重復性差。
三、上海飛測霉菌毒素熒光定量快速檢測系統(tǒng)
上海飛測生物基于熒光定量FPOCT?快速檢測技術平臺,率先推出了飼料中真菌毒素熒光定量快速檢測系統(tǒng),包含快速檢測儀和熒光定量快速檢測/卡試紙條,可在8min內快速準確定量的測定出飼料原料及配合飼料中的各種霉菌毒素的含量,樣品前處理簡單(僅需7min),操作簡便,只需一步加樣,無需標準品,無需做標準曲線,采用熒光免疫定量分析儀讀數,結果準確可靠且可現場打印,準確性高度符合HPLC法的檢測結果,為飼料質量安全的快速檢測和控制提供了一種全新的技術手段,適用于各類飼料加工企業(yè)、養(yǎng)殖企業(yè)、第三方檢測機構及政府相關監(jiān)管部門。
3.1.檢測原理
當將樣品滴加在加樣區(qū)時,樣品中的待測物與結合墊中的熒光微球標記抗體結合并通過毛細作用向前層析,當達到檢測區(qū)后,檢測線T線上固定的抗原與剩余的部分熒光微球標記抗體結合,檢測線T線上結合的熒光微球標記抗體的量與樣品中待測物的量成反比,質控線C線結合的熒光標記物樣品中待測物的量無關,其它熒光標記物繼續(xù)層析達到吸收區(qū)。層析結束后,采用熒光讀數儀的讀取T線和C線的熒光強度并計算T/C值,通過儀器內置的標準曲線即可計算出樣品中待測物的含量。
3.2 時間分辨熒光納米微球標記技術
采用聚苯乙烯納米微球對稀土熒光離子銪進行包裹,通過熒光預增強技術,提升單個熒光離子的熒光強度。通過對包裹技術的優(yōu)化和改良,納米微球中銪離子的密度可提升到10萬個/微球,包裹完熒光離子后,在微球表面再進行葡聚糖修飾,大大提升了微球的穩(wěn)定性和對可逆環(huán)境的抗干擾性。在此基礎上可開發(fā)出的熒光定量免疫層析技術靈敏度高于膠體金、有色乳膠和普通熒光免疫層析方法1-3個數量級,穩(wěn)定性和精密度更好,線性范圍更寬。
3.3雙T線定量檢測技術
目前,普通免疫層析快檢產品通常采用單檢測線(T線)定量方法,產品研發(fā)周期更短,生產工藝更為簡單,成本也更低,但檢測結果的精密度難以控制,導致結果的重復性較差。我們在單T線的基礎上,增加了一條矯正T線,與質控線(C線)一起,形成“雙保險”,大大提升了檢測結果的精密度和重復性。
3.4霉菌毒素快速檢測儀和快檢箱
上海飛測生物針對不同領域檢測項目、使用場景和功能需求,已陸續(xù)推出了多款不同型號的FD系列熒光免疫快速檢測儀,滿足食品安全領域快速定量檢測的需要。儀器采用高效的激發(fā)和接收光學系統(tǒng)、精密控制算法和數據處理算法,實現了儀器的小型化、便攜化、智能化和網絡化,整個讀數過程僅需5s即可完成,通過二維碼掃描功能實現檢測樣本信息的自動讀取;通過內置定量技術,自動計算檢測結果。檢測結果可現場打印,也可通過GPRS實時傳送到溯源管理云平臺,實現檢測結果的自動分析、全過程質量控制、檢測數據共享、溯源管理、大數據分析等功能,實現對食品安全的實時監(jiān)測和管理。
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